内容概要
钙离子是细胞内最重要的第二信使之一,参与细胞增殖、凋亡、肌肉收缩、神经递质释放、信号转导等几乎所有关键生理过程,胞内游离钙离子浓度的精准检测,是研究细胞信号通路、药物作用机制的核心实验手段。传统钙荧光探针存在加载效率低、荧光强度弱、无法适配动态检测等问题,影响实验效果。Abbkine Fluo-4 钙离子检测试剂盒(货号 KTA7010)采用升级的 Fluo-4 AM 荧光探针,荧光亮度更高、细胞加载效率好,配套专用染色增强剂,同时适配荧光显微镜、荧光酶标仪与流式细胞仪,既可静态定量胞内钙浓度,也可实时监测钙信号动态变化,为钙信号研究提供可靠的技术支撑。
产品介绍
Abbkine KTA7010 试剂盒是基于 Fluo-4 AM 探针的细胞内钙离子检测试剂,核心组分包括 500×Fluo-4 AM 探针、500× 染色增强剂以及检测缓冲液,规格为 200 次检测,采用蓝冰冷链运输,收到后于 - 20℃避光环境可稳定保存 12 个月。
该试剂盒中的 Fluo-4 是经典钙探针 Fluo-3 的升级衍生物,通过将结构中的氯原子替换为氟原子,激发波长向短波长偏移约 10nm,更适配常规氩离子激光器的激发波长,荧光强度显著提升。配套的染色增强剂可有效提升探针的细胞穿透效率,尤其对原代细胞、难转染细胞效果突出,能够有效降低实验摸索成本,提升检测灵敏度。
检测原理
Fluo-4 AM 是经过乙酰甲酯(AM)修饰的脂溶性钙荧光探针,可自由穿透活细胞的细胞膜进入细胞内部。进入细胞后,胞质内的酯酶会水解掉 AM 基团,生成带负电荷的 Fluo-4 分子,无法再次穿透细胞膜,从而滞留在细胞内。
游离状态的 Fluo-4 荧光强度极低,当与胞内游离钙离子结合后,其分子内电荷转移引发共轭体系电子云重排,荧光强度可提升数十至上百倍,且荧光强度与胞内游离钙离子的浓度在一定范围内呈正相关关系。因此,通过检测细胞的绿色荧光强度,即可间接反映胞内游离钙离子的浓度水平。配合药物刺激与实时成像,还可以动态追踪胞内钙离子浓度的变化过程,解析钙信号的动力学特征。
产品优势
其一,探针性能优异,荧光亮度高。Fluo-4 相比传统 Fluo-3 探针,激发波长更匹配常规激光共聚焦显微镜与流式细胞仪的氩离子激光器,同等条件下荧光强度更高,检测灵敏度更好,能够捕捉更微弱的钙离子浓度变化。
其二,加载效率高,适配难转染细胞。试剂盒配套专用染色增强剂,可有效提升探针的细胞膜穿透效率,对于原代细胞、干细胞等难加载的细胞类型,能够显著提高染色成功率与信号强度,减少实验条件摸索。
其三,多平台适配,应用场景灵活。试剂盒同时适配荧光显微镜(含激光共聚焦)、荧光酶标仪与流式细胞仪三类检测平台:共聚焦显微镜可实现单细胞水平的动态钙成像,酶标仪可完成高通量样本的批量定量,流式细胞仪可实现细胞群体的钙信号统计,一套试剂可满足多元实验需求。
其四,支持动态检测,适合动力学研究。探针响应速度快,可实时追踪药物刺激、受体激活后胞内钙离子的快速变化,适合 GPCR 激活、离子通道开放等快速钙信号的动力学研究,能够捕捉钙振荡、钙峰等动态信号特征。
应用领域
在细胞信号转导研究中,可用于检测 G 蛋白偶联受体(GPCR)、受体酪氨酸激酶、离子通道激活后的钙信号变化,解析下游信号通路的调控机制,是细胞信号研究的核心检测工具。
在神经科学研究领域,可用于检测神经元的钙振荡、突触传递过程中的钙信号变化,研究神经元兴奋、神经递质释放的机制,也可用于脑片、类器官的钙成像研究。
在心血管研究中,可检测心肌细胞、血管平滑肌细胞的钙信号变化,研究心肌收缩、血管舒张收缩的调控机制,评估心血管药物对钙信号的影响。
在药物筛选研究中,可基于钙信号构建高通量筛选模型,筛选作用于 GPCR、钙通道的候选药物,评估药物的激动或拮抗活性,适合创新药物的早期筛选。
总结
Abbkine Fluo-4 钙离子检测试剂盒 KTA7010 以高性能的 Fluo-4 探针为核心,搭配专用染色增强剂,兼具高亮度、高加载效率、多平台适配的优势,既可以静态定量胞内钙浓度,也能够实时追踪钙信号动态变化。无论是基础信号机制研究还是药物筛选应用,该试剂盒都能提供稳定、灵敏的钙离子检测服务,助力钙信号相关科研工作的深入开展。