Calmodulin Kinase II Substrate (Syntide 2)；PLARTLSVGLPGKK

一、基础信息

• 中文名称：钙调蛋白激酶 II 底物肽（Syntide 2）

• 英文名称：Calmodulin Kinase II Substrate (Syntide 2)

• 三字母序列：Pro-Leu-Ala-Arg-Thr-Leu-Ser-Val-Gly-Leu-Pro-Gly-Lys-Lys

• 单字母序列：PLARTLSVGLPGKK

• 氨基酸数量：14 aa

• 分子式：C65H117N19O17

• 分子量：1436.77

• 结构修饰：线性多肽，游离 N 端氨基、游离 C 端羧基；无乙酰、酰胺、二硫键、环化、特殊修饰氨基酸；Ser 为激酶磷酸化靶位点。

• 结构式：

二、理化性质

1. 紫外定量：无 Tyr、Phe、Trp、Met，280 nm 无紫外吸收，需 BCA、Lowry、氨基酸分析法、茚三酮法定量。

2. 稳定性：不含 Cys、Met，无氧化降解风险；无光敏芳香氨基酸，常规避光保存即可；序列含两处 Pro，形成刚性 β 转角，抗普通蛋白酶水解能力优于无 Pro 柔性肽。

3. 酸碱特性：碱性残基 Arg、Lys 富集，无酸性氨基酸，整体呈强碱性；pH 6.5–7.6 激酶反应缓冲液、PBS、细胞裂解液中稳定性佳。

4. 溶解性：Thr、亲水带电碱性残基丰富，水溶性极好，中性缓冲液常温可完全溶解。

5. 空间构象：双 Pro 固定肽链局部转角，Ser 位点暴露于肽链外侧，是 CaMKII 特异性识别与磷酸化位点。

三、来源背景

人工设计合成的经典 CaMKII 特异性底物模拟肽，基于天然磷酸化底物保守序列改造，是钙信号、钙调蛋白激酶活性检测实验通用阳性底物。

四、生物学功能

1. 钙 - 钙调素激活 CaMKII 后，特异性催化序列内 Ser 残基发生磷酸化。

2. 高亲和力结合活化型 CaMKII，磷酸化效率高，是体外激酶活性检测标准底物。

3. 仅被 CaMKII 高效修饰，对 PKA、PKC 等其他丝氨酸 / 苏氨酸激酶亲和力极低，特异性优异。

五、科研应用

1. CaMKII 激酶活性体外检测：同位素标记、Western 磷酸化抗体、荧光定量激酶实验底物。

2. 钙信号通路研究：神经元、心肌细胞钙信号下游 CaMKII 功能验证。

3. 激酶抑制剂筛选：用于高通量筛选 CaMKII 特异性小分子抑制剂。

4. 钙调蛋白 - 激酶互作机制：探究 CaM 结合对激酶底物识别能力的调控。

六、溶解与储存规范

1. 溶解：pH7.2 无菌 PBS 或激酶反应缓冲液常温配制，无隔氧特殊要求。

2. 冻干粉：短期 - 20 ℃密封避光保存；长期分装后 - 80 ℃储存。

3. 工作液：单次分装避免反复冻融；2~8 ℃避光可稳定存放 7–10 天。