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Biotinyl-GRF (1-44) (ovine)

Biotinyl-GRF (1-44) (ovine)
📅 发布时间:2026/7/9 8:08:03

一、基础信息

  • 中文全称:N 端生物素修饰绵羊生长激素释放激素全长 1-44 肽
  • 英文全称:Biotinyl-Growth Hormone-Releasing Factor (ovine, 1-44)
  • 三字母序列:Biotin-Tyr-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr-Arg-Lys-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Gly-Ala-Lys-Val-Arg-Leu-NH₂
  • 单字母序列:Bio-YADAIFTNSYRKI LGQLSARKLLQDIMNRQQGERNQEQGAKVRL-NH₂
  • 氨基酸总数:44 aa
  • 分子式:C221H368N72O66S
  • 分子量:5121.87
  • 结构修饰说明:
  1. N 端共价修饰生物素(Biotin / Bio);
  2. C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
  3. 无环化、二硫键、焦谷氨酸、乙酰、侧链定点修饰。
  • 结构式:

二、理化性质

1.紫外定量:含 Tyr、Phe、Met,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法定量。

2.稳定性要点

  • 含 Met,极易氧化;溶解、分装全程冰浴,减少空气暴露;长期冻干粉分装充氮气隔氧保存;
  • Tyr、Phe 为光敏芳香残基,配液、分装、储存全程避光;
  • 无脯氨酸,整条肽链柔性高;N 端生物素、C 端酰胺两端封闭,可抵御氨基肽酶、羧肽酶,但 44 aa 长链易被内肽酶剪切,工作液现配现用。

3.酸碱特性
酸性残基:Asp、Glu;碱性残基:Arg、Lys;整体偏弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、绵羊垂体原代细胞培养液、羊血浆缓冲体系。

4.溶解性
Thr、Ser、Asn、Gln 大量亲水残基搭配带电酸碱氨基酸,水溶性优异,中性缓冲液常温完全溶解。

5.空间构象
中段保守两亲 α 螺旋为 GHRH 受体核心识别区域;N 端生物素远离受体结合口袋,不干扰多肽与绵羊 GHRHR 受体结合亲和力。

三、来源背景

绵羊下丘脑分泌内源全长 GRF (1-44),与人、猪序列多处位点突变;N 端偶联生物素作为绵羊专属亲和探针,用于反刍动物生长内分泌、垂体受体互作研究。

四、生物学功能

  1. 特异性激活绵羊垂体 GHRH 受体,强效刺激生长激素 GH 合成与释放;
  2. 调控绵羊生长速度、脂肪沉积、骨骼发育、泌乳相关内分泌稳态;
  3. 介导应激、采食、昼夜节律对 GH 分泌的调控;
  4. 生物素标签特异性结合链霉亲和素树脂,Pull-down 富集绵羊 GHRH 受体及下游互作信号蛋白,用于竞争性结合、细胞荧光示踪实验。

五、科研应用

  1. 绵羊原代垂体细胞 Pull-down,捕获绵羊 GHRHR 受体及结合蛋白;
  2. 反刍动物 GHRH 受体激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验;
  3. 肉羊生长调控、泌乳机制、垂体内分泌体外细胞模型;
  4. 人 / 猪 / 绵羊 GRF 跨物种序列、受体亲和力构效对比研究;
  5. 免疫荧光 / 化学发光示踪绵羊垂体、外周组织 GHRH 受体分布与内吞。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间降低 Met 氧化;
  2. 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
  3. 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。

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