一、基础信息
- 中文全称:N 端生物素修饰人源胃泌素 I(Gastrin 17)
- 英文全称:Biotinyl-Gastrin I (human)
- 三字母序列:Biotin-Gln-Gly-Pro-Trp-Leu-Glu-Glu-Glu-Glu-Glu-Ala-Tyr-Gly-Trp-Met-Asp-Phe-NH₂
- 单字母序列:Bio-QGPWLEEEEEAYGWMDF-NH₂
- 氨基酸总数:17 aa
- 分子式:C97H127N21O31S
- 分子量:2115.26
- 结构修饰说明:
- N 端氨基共价修饰生物素(Biotin / Bio);
- C 端苯丙氨酸酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 线性多肽,含 Pro 形成刚性转角;无分子内环、二硫键、焦谷氨酸、侧链定点修饰。
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含 Trp、Tyr、Met、Phe,280 nm 紫外吸收极强,可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性要点
- 含 Met,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴,减少空气敞口接触;长期冻干粉分装充氮气隔氧保存;
- Trp、Tyr、Phe 均为强光敏芳香残基,配液、储存全程避光操作;
- 序列含 Pro 稳定局部构象;N 端生物素、C 端酰胺双重封端,抵御氨基肽酶、羧肽酶;但连续 5 个 Glu 易被内肽酶切割,工作液现配现用。
3.酸碱特性
大量酸性 Glu、Asp;碱性残基仅 N 端 Gln 无电荷,整体强酸性多肽;适配 pH 6.0–7.4 PBS、人胃窦 G 细胞、肠细胞培养液、人血浆缓冲液。
4.溶解性
Gln 亲水残基搭配高密度负电谷氨酸,水溶性极佳,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
C 端 WMDF-NH₂是胃泌素受体 CCKBR 核心识别必需序列;N 端生物素位于配体远端,不干扰多肽与 CCKBR 结合亲和力与激动活性。
三、来源背景
人胃窦 G 细胞分泌 Gastrin I(G17),是调控胃酸分泌核心胃肠激素;N 端偶联生物素作为人源 CCKBR 专属亲和探针,用于胃、胰腺细胞受体互作实验。
四、生物学功能
- 特异性结合胆囊收缩素 B 受体 CCKBR,强效刺激壁细胞胃酸、胃蛋白酶原分泌;
- 促进胃黏膜增殖、胃肠平滑肌收缩、胆囊轻度收缩;
- 参与胃泌素瘤、胃溃疡、胃肠肿瘤增殖调控;
- 生物素标签特异性结合链霉亲和素树脂,Pull-down 富集 CCKBR 受体及下游信号蛋白,用于竞争性结合、细胞荧光示踪。
五、科研应用
- 人胃窦原代细胞、胃壁细胞 Pull-down 捕获 CCKBR 受体及互作蛋白;
- CCKBR/CCKAR 受体激动剂、拮抗剂体外筛选、配体竞争结合实验;
- 胃溃疡、胃泌素瘤、胃肠动力紊乱体外细胞模型;
- Gastrin / CCK 家族多肽构效对比研究;
- 免疫荧光示踪人胃、胰腺组织 CCKBR 分布与受体内吞。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间降低 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2–8 ℃避光存放不超过 3–5 天。