吲哚菁绿-反式环辛烯 ICG-TCO 荧光标记点击化学 制备方法

一、核心反应原理

xi an瑞.禧.小编 整理的ICG-TCO的制备基于酰胺化反应，通过将吲哚菁绿（ICG）的羧基官能团与反式环辛烯（TCO）的伯胺基团共价连接，形成稳定的酰胺键。该反应需在温和条件下进行，以避免破坏ICG的荧光性能或TCO的反应活性。

二、反应示意图

1.ICG羧酸活化

2.酰胺化反应

三、详细制备步骤
① ICG-NHS 酯制备ICG-COOH + NHS + EDC·HCl，无水 DMF/DMSO 中室温搅拌
② TCO-胺准备取 TCO-amine 原料 — MS / NMR 验证结构与纯度
③ 酰胺化偶联ICG-NHS + TCO-amine，缓冲溶液中室温搅拌过夜 pH 7.5–8.5，避光，反应至 ICG-NHS 完全消耗 TLC / HPLC 监控
④ 产物纯化透析（去小分子）→ 凝胶过滤（Sephadex G-25）/ HPLC → 冻干

制备流程总览
活化 ICG-COOH → ICG-NHS
质控 TCO-amine结构确认
偶联 ICG-NHS + TCO-amine → ICG-TCO
纯化 透析 → 色谱 → 冻干
储存 避光密封、-20°C

四、关键注意事项

瑞禧tech小编总结分享.2026.5