CRF (bovine) ;SQEPPISLDLTFHLLREVLEMTKADQLAQQAHNNRKLLDIA
一、基础信息
- 中文名称:牛源促肾上腺皮质激素释放因子
- 英文名称:Corticotropin-Releasing Factor (bovine),简称 bCRF
- 三字母序列:Ser-Gln-Glu-Pro-Pro-Ile-Ser-Leu-Asp-Leu-Thr-Phe-His-Leu-Leu-Arg-Glu-Val-Leu-Glu-Met-Thr-Lys-Ala-Asp-Gln-Leu-Ala-Gln-Gln-Ala-His-Asn-Asn-Arg-Lys-Leu-Leu-Asp-Ile-Ala
- 单字母序列:SQEPPISLDLTFHLLREVLEMTKADQLAQQAHNNRKLLDIA
- 氨基酸数量:41 aa
- 分子式:C206H340N60O63S
- 分子量:4697
- 结构修饰:线性多肽,C 端酰胺化 (-NH₂),无 N 端修饰、无二硫键、无环化结构;与羊源 CRF 为近源同源肽,仅少数位点氨基酸存在差异。
- 结构式:
二、理化性质
- 紫外定量:含 Phe、His,280 nm 有紫外吸收,可直接采用紫外分光光度法定量。
- 稳定性:序列含有Met(甲硫氨酸),极易氧化;Phe、His 为光敏残基,全程需避光、隔氧、低温操作与储存;多处 Pro 形成肽链刚性转角,整体抗蛋白酶水解能力较好。
- 酸碱特性:大量酸性残基 Glu、Asp,搭配碱性残基 Arg、Lys、His,整体呈弱酸性;在 pH 6.8~7.6 生理缓冲液中稳定性最优,适配 PBS、人工脑脊液、细胞培养液。
- 溶解性:极性、带电氨基酸占比高,水溶性优异,纯水、中性缓冲液常温可完全溶解。
- 空间构象:N 端双 Pro 形成固定转角,肽链主体易形成 α- 螺旋,是结合 CRF 受体的关键构象;C 端酰胺可抵御羧肽酶降解,提升整体结构稳定性。
三、来源背景
天然牛源下丘脑分泌多肽,为下丘脑 - 垂体 - 肾上腺轴(HPA 轴)核心调控因子。和羊源 CRF 同源性极高,仅个别氨基酸位点不同,常用于不同物种 CRF 的序列、活性、受体亲和力对比研究,是神经内分泌、应激领域常用工具肽。
四、生物学功能
- 特异性结合垂体 CRF 受体,促进 ACTH 释放,进一步诱导肾上腺分泌糖皮质激素,调控 HPA 轴整体功能。
- 参与机体应激应答,介导焦虑、抑郁、睡眠紊乱等情绪与行为变化,同时调控中枢神经、自主神经活动。
- 影响免疫功能与机体代谢稳态;C 端酰胺结构显著延长体内作用半衰期。
- 物种间细微序列差异,使其在受体结合亲和力、组织分布上与羊源 CRF 存在小幅区别。
五、科研应用
- 神经内分泌实验:激活 HPA 轴,用于激素分泌、内分泌调控机制研究。
- 应激与精神药理模型:构建焦虑、抑郁、慢性应激动物模型,筛选评价相关药物。
- CRF 受体药理研究:作为天然激动剂对照,开展受体结合、信号通路、激动剂 / 拮抗剂筛选。
- 物种同源肽对比分析:联合羊源、人源 CRF,研究氨基酸位点差异对活性、选择性的影响。
六、溶解与储存规范
- 溶解:选用无菌 pH7.2 PBS 或超纯水,冰浴避光配制,减少 Met 氧化,建议现配现用。
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封保存;长期分装后 - 80 ℃充氮气隔氧储存。
- 工作液:按单次用量分装,严禁反复冻融;2~8 ℃避光密封存放不超过 3 天。
